Development of a human corneal epithelium model utilizing a collagen vitrigel membrane and the changes of its barrier function induced by exposing eye-irritant chemicals

DOI
  • NISHIKAWA Kazunori
    Transgenic Animal Research Center, National Institute of Agrobiological Sciences Graduate School of Life and Environmental Sciences, University of Tsukuba
  • TAKEZAWA Toshiaki
    Transgenic Animal Research Center, National Institute of Agrobiological Sciences
  • YAMAMOTO Tomoko
    Transgenic Animal Research Center, National Institute of Agrobiological Sciences
  • WANG Pi-Chao
    Graduate School of Life and Environmental Sciences, University of Tsukuba

Bibliographic Information

Other Title
  • コラーゲンビトリゲル薄膜を利用したヒト角膜上皮モデルの開発とその眼刺激性化学 物質の暴露によるバリア機能の変化
Published
2010
DOI
  • 10.14869/toxp.37.0.128.0
Publisher
The Japanese Society of Toxicology

Description

【目的】コラーゲンビトリゲル薄膜は生体内の結合組織に匹敵する高密度コラーゲン線維で構成されており，細胞の培養担体としての利 用が進んでいる。これまでに，ウサギを用いた眼刺激性試験（ドレイズ試験）の代替法の開発を目指して，正常ウサギ角膜上皮細胞をコ ラーゲンビトリゲル薄膜担体上に多層化培養することで，ウサギ角膜上皮モデルを作製する技術を確立した。本研究では，ヒト角膜上 皮細胞株（HCE-T細胞）とコラーゲンビトリゲル薄膜を用いて，バリア機能を有するヒト角膜上皮モデルを作製する技術の確立を目指 した。さらに，このヒト角膜上皮モデルの有用性を検証するために，眼刺激性の化学物質を暴露して惹起されるバリア機能の変化を測 定した。【方法】HCE-T細胞をコラーゲンビトリゲル薄膜上に播種してコンフルエントになるまで2日間培養した後，液相-気相の界面 培養を施すことで角膜上皮モデルの構築を検討した。角膜上皮モデルのバリア機能の形成は，経上皮電気抵抗（TEER; Transepithelial Electrical Resistance）測定で解析した。この角膜上皮モデルに各種化学物質（NaOH，Ethanol，TWEEN 20等）を暴露し，TEER値 の経時変化を測定した。【結果と考察】HCE-T細胞はコラーゲンビトリゲル薄膜上で良好に増殖し，液相-気相の界面培養では経時的に 多層化分化して，TEER値も上昇した。1週間の界面培養では，5層程度の細胞層からなる角膜上皮モデルが構築できることが分かった。 この角膜上皮モデルを用いた化学物質の曝露試験では，被験物質に応じて異なるTEER値の経時的変化を認めた。この結果は，構築し たヒト角膜上皮細胞モデルのバリア機能の変化を指標として，化学物質の眼刺激性が評価できる可能性を示唆する。

Journal

Keywords

Details 詳細情報について

  • CRID
    1390282680635981440
  • NII Article ID
    130007004087
  • DOI
    10.14869/toxp.37.0.128.0
  • Text Lang
    ja
  • Data Source
    • JaLC
    • CiNii Articles
  • Abstract License Flag
    Disallowed

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