A Technique for Detection of Sister Chromatid Exchanges in Flowering Plant, and Spontaneous Sister Chromatid Exchanges in Vicia faba

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抄録

A method for the detection of sister chromatid exchanges (SCE's) of Vicia faba chromosomes in fluorescent plus Giemsa technique has been developed employinng enzymatic maceration and successive flame-drying for chromosome spreading after incorporation of BrdUrd without FdUrd. The minimum concentration of BrdUrd to detect SCE's in the present method was 1.0μg/ml. The mean SCE frequency per cell varied from 10.1 to 11.6 after two cell cycle cultivations in water containing BrdUrd concentration ranging from 1.0μg/ml to 30.0μg/ml and over 30.0μg/ml the frequency showed the extream increasing. Spontaneous SCE's after two cell cycle incorporation of BrdUrd were presumed to be about 10-12 exchanges per cell in the concentration of BrdUrd at 30.0μg/ml or below.

ソラマメの板端分裂組織細胞における姉妹染色分体交換(sister chromatid exchange;SCE)の検出は,30.71-153.55μg/mlの5-bromodeoxyuridine(BrdUrd)をDNAの前駆体の一つのthymidilic acidの細胞内合成を阻害する5-fluorodeoxyuridine(FdUrd)の共存下で核DNAに取り込ませ(Kihlman and Kronborg,1975),蛍光色素とギムザ染色によるFPG法(fluorescent plus Giemsa technique;PERRY and WOLFF,1974)で行なわれている。しかし,高濃度のBrdUrdはSCEを誘発し(KATO,1974),FdUrdはDNA合成阻害の他にUrd合成阻害,染色体切断,細胞周期所要時間の遅延化などを引き起こすことも知られている(HAUT and TAYLOR,1967;KIHLMAN,1971)。そこで,FdUrdを併用しないBrdUrd(1.0-100.0μg/ml)の核DNAへの取り込ませ,ペクチナーゼ・セルラーゼ処理による細胞壁の消化と引火乾燥法による染色体のスライドグラスヘの塗抹によるFPG法での,姉妹染色分体交換の検出法を開発した。本方法でSCEを検出できたBrdUrdの最小濃度は1.0μg/mlであった。また,1.0-30.0μg/mlのBrdUrdを含む水溶液で,2細胞周期に渡りBrdUrdを取り込ませた後に得られた1細胞当たりのSCEの平均数は10.1-11.6であった。しかし,BrdUrd濃度が50.0および100.0μg/mlでは,その平均数はそれぞれ19.1と26.7と急増していた(Table 2)。すなわち,ソラマメの根端細胞における自然発生的姉妹染色分体交換の頻度は,BrdUrd濃度が30.0μg/mlあるいはそれ以下では,1細胞当たり約10-12であり,DNA 1pg当たり約0.3であった。

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詳細情報 詳細情報について

  • CRID
    1050001202684393344
  • NII論文ID
    110006151377
  • NII書誌ID
    AN00246584
  • ISSN
    05135613
  • Web Site
    http://hdl.handle.net/10131/3033
  • 本文言語コード
    en
  • 資料種別
    departmental bulletin paper
  • データソース種別
    • IRDB
    • CiNii Articles

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