ミニチュアブタにおける血漿中コルチゾールの酵素免疫測定法

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  • ミニチュアブタ ニ オケル ケッショウ チュウ コルチゾール ノ コウソ メンエキ ソクテイホウ

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標識ホルモンとしてperoxidaseを用いたEIAにより、ミニチュアブタ血漿中コルチゾール濃度の測定が可能であるか検討した。抗血清はCortisol-3-CMO-BSAを自作し、標識ホルモンとしてCortisol-3-CMO-HRPを用いた。抗血清の力価を検討した結果、抗血清の適性希釈倍率は、201000～242000倍であり、本EIAにおいては、200000倍にて使用した。標準曲線の作成が可能な範囲は0.01～50ngであり、各濃度における結合率の変動係数（n=6）は2.32～11.67％、測定感度は0.012ng/wellであった。ミニチュアブタ血漿中のコルチゾール添加回収実験では、平均96.0±5.5％、変動係数は10.4％となった。コルチゾール濃度の異なる3種類の雄ミニチュアブタ血漿（n=6）について再現性の検討を行った結果、測定内変動係数は5.4～8.8％、平均7.2％であった。また、測定間変動係数は6.7～11.4％、平均9.0％であった。本方法を用い、妊娠末期から分娩後5日目までの血漿中コルチゾール濃度を測定した。分娩前までの変動は徐々に増加する傾向が見られ、分娩日には90.4ng/mlの最高値を示し、分娩後3日間は25ng/ml前後で推移した。以上の結果から、本方法を用いてミニチュアブタ血漿中コルチゾール濃度を推定できることが明らかとなった。

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