The Bile Acid Binding Activity and the Screening of Active Substances in Quinoa Pericarp Extract

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  • キノア果皮抽出物の胆汁酸吸着作用と作用物質の検索
  • キノア カヒ チュウシュツブツ ノ タンジュウサン キュウチャク サヨウ ト サヨウ ブッシツ ノ ケンサク

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キノア果皮を70℃温水,50%エタノール,メタノールでそれぞれ抽出し,また,70℃温水で抽出した抽出液を透析した。これら4種類のキノア果皮抽出液を凍結・凍結乾燥し,タウロコール酸を用いて胆汁酸吸着活性を測定した。その結果,温水抽出物であるQPEDが最も高い値を示したため,主な活性物質は水溶性であると考えられた。胆汁酸吸着活性物質を検索するため,QPEDをSephacryl S-300を用いてゲル濾過クロマトグラフィーにより分画した。その結果,中心分画分子量3.7×10^5,2.8×10^3,9.5×10^2にピークが認められた。また,3.7×10^5の画分のみに280nmの吸収が認められた。これらの画分の胆汁酸吸着率を測定した結果,ピークが認められた画分の全てが10%前後の胆汁酸吸着率を示した。また,中心分画分子量3.7×10^5,2.8×10^3,9.5×10^2に活性が認められたことから,活性物質は高分子物質であると考えられる。次に,タンパク質分解酵素であるプロティナーゼKをQPEDに作用させ,胆汁酸吸着活性の有無を測定した結果,胆汁酸吸着活性に変化は認められなかった。さらに,ゲル濾過クロマトグラフィーにより分画したQPEDを加水分解して薄層クロマトグラフィーで展開させたところ,主なスポットとしてマルトースが検出された。以上のことから,活性物質はマルトースを主な構成糖とする多糖であると推測している。

Quinoa pericarp was extracted with 70℃ water (QPE), 50% ethanol (QPE-50%Et-OH), and methanol (QPE-Me-OH), respectively. The QPE was dialyzed using ion-exchange water (QPED). These four kinds of Quinoa pericarp extracts were disintegrated by freeze-drying. The bile acid binding activity of quinoa extracts was measured by the spin column method using sodium taurocholate. Since QPED showed the highest binding activity of these extracts, it was thought that the main active substances were water soluble. In order to find a bile acid binding activity substance, QPED was fractionated by gel filtration chromatography using Sephacryl S-300. Consequently, the 3 fractions obtained in the molecular weight of center part were 3.7×10^5, 2.8×10^3, and 9.5×10^2. Moreover, 280nm absorption was shown in only part for the molecular weight of 3.7×10^5. As a result of measuring the rate of bile acid binding for these fractions, we could see that all the fractions showed bile acid binding at around 10%. Moreover, since activity obtained in the molecular weight of the center part was 3.7×10^5, 2.8×10^3, and 9.5×10^2, it is thought that an active substance is also a high molecular weight substance. Proteinase K treated QPED showed bile acid binding activity too. As a result, no change was found by protease treatment. Furthermore, maltose was detected in the spots, when each fraction of QPED was hydrolyzed by HC1 and made to develop by thin layer chromatography. From the above results, it is being surmised that active substances in quinoa pericarp are polysaccharides of which maltose is the main constituent.






    GAKUEN 770 89-94, 2004-12-01



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