Glycoproteomic Analysis of Chloroplasts Isolated from Rice Mature Leaves

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  • イネ葉緑体のグライコプロテオーム解析

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抄録

We performed a glycoproteomic analysis of rice chloroplast. Intact chloroplasts were isolated from mature leaves of rice using discontinuous Percoll density gradient centrifugation. The isolated chloroplast proteins were subjected to sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, followed by lectinoblotting with peroxidase-conjugated Concanavalin A. Glycoproteins detected with Concanavalin A-peroxidase were analyzed by a mass spectrometry, indicating that phosphoglycerate kinase-like protein which has signal peptide and N-linked oligosaccharide chains occurs in chloroplasts of rice.

イネ葉緑体タンパク質のグライコプロテオーム解析を行った。イネ成熟葉から不連続パーコール密度勾配遠心分離法を用いて無傷の葉緑体を単離した。葉緑体タンパク質を調製し、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動の後、ペルオキシダーゼ標識Concanavalin Aを用いたレクチンブロッティングを行った。ペルオキシダーゼ標識Concanavalin Aにより検出されたいくつかのタンパクバンドを質量分析装置を用いて解析した結果、ERシグナルペプチドとN結合型糖鎖結合部位を持つホスホグリセリン酸キナーゼ様タンパク質がイネ葉緑体に局在していることが示唆された。

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