Detection of Wolbachia in field-collected Aedes aegypti mosquitoes in metropolitan Manila, Philippines

Des rapports récents révèlent la présence de Wolbachia chez Ae. aegypti. Notre étude présente un soutien supplémentaire pour l'infection à Wolbachia chez Ae. aegypti en dépistant les moustiques adultes collectés sur le terrain à l'aide de deux fabricants de molécules spécifiques à Wolbachia. Un total de 672 moustiques adultes Ae. aegypti ont été collectés de mai 2014 à janvier 2015 dans la région métropolitaine de Manille. Chaque échantillon individuel a été traité et criblé pour la présence de Wolbachia par des marqueurs sélectionnés, l'ADNr 16S spécifique de Wolbachia et sa protéine de surface (WSP), dans des conditions de PCR optimisées et séquencées. Des totaux de 113 (16,8 %) et 89 (13,2 %) échantillons de moustiques individuels ont été déterminés comme étant infectés par Wolbachia à l'aide des marqueurs d'ADNr WSP et 16S, respectivement. Les séquences d'échantillons d'Ae. aegpyti wsp étaient similaires ou identiques à cinq souches connues de Wolbachia appartenant aux supergroupes A et B, tandis que la majorité des séquences d'échantillons d'ADNr 16S étaient similaires aux souches appartenant au supergroupe B. Dans l'ensemble, 80 (11,90 %) échantillons individuels de moustiques ont montré des amplifications positives dans les deux marqueurs et 69 % ont montré une congruence dans l'identification du supergroupe (supergroupe B). En utilisant deux fabricants moléculaires spécifiques de Wolbachia, notre étude a démontré la présence de Wolbachia à partir d'échantillons individuels d'Ae. aegypti. Nos résultats ont montré un faible taux d'infection par Wolbachia et ont déduit que les souches détectées appartiennent à l'un ou l'autre des supergroupes A et B.

Informes recientes revelan la presencia de Wolbachia en Ae. aegypti. Nuestro estudio presenta apoyo adicional para la infección por Wolbachia en Ae. aegypti mediante la detección de mosquitos adultos recolectados en el campo utilizando dos creadores moleculares específicos de Wolbachia. Se recolectaron un total de 672 mosquitos adultos de Ae. aegypti desde mayo de 2014 hasta enero de 2015 en el área metropolitana de Manila. Cada muestra individual se procesó y se analizó para detectar la presencia de Wolbachia mediante marcadores seleccionados, ADNr 16S específico de Wolbachia y su proteína de superficie (wsp), en condiciones optimizadas de PCR y se secuenció. Se determinó que los totales de 113 (16.8%) y 89 (13.2%) muestras individuales de mosquitos estaban infectadas con Wolbachia utilizando los marcadores de ADNr wsp y 16S, respectivamente. Las secuencias de la muestra de Ae. aegpyti wsp fueron similares o idénticas a cinco cepas conocidas de Wolbachia pertenecientes a los supergrupos A y B, mientras que la mayoría de las secuencias de la muestra de ADNr 16S fueron similares a las cepas pertenecientes al supergrupo B. En general, 80 (11,90%) muestras individuales de mosquitos mostraron amplificaciones positivas en ambos marcadores y el 69% mostró congruencia en la identificación del supergrupo (supergrupo B). Al utilizar dos creadores moleculares específicos de Wolbachia, nuestro estudio demostró la presencia de Wolbachia de muestras individuales de Ae. aegypti. Nuestros resultados mostraron una baja tasa de infección por Wolbachia e infirieron que las cepas detectadas pertenecen a los supergrupos A y B.

Recent reports reveal the presence of Wolbachia in Ae. aegypti. Our study presents additional support for Wolbachia infection in Ae. aegypti by screening field-collected adult mosquitoes using two Wolbachia-specific molecular makers.A total of 672 Ae. aegypti adult mosquitoes were collected from May 2014 to January 2015 in Metropolitan Manila. Each individual sample was processed and screened for the presence of Wolbachia by selected markers, Wolbachia-specific 16S rDNA and its surface protein (wsp), under optimized PCR conditions and sequenced.Totals of 113 (16.8%) and 89 (13.2%) individual mosquito samples were determined to be infected with Wolbachia using the wsp and 16S rDNA markers, respectively. The Ae. aegpyti wsp sample sequences were similar or identical to five known Wolbachia strains belonging to supergroups A and B while the majority of 16S rDNA sample sequences were similar to strains belonging to supergroup B. Overall, 80 (11.90%) individual mosquito samples showed positive amplifications in both markers and 69% showed congruence in supergroup identification (supergroup B).By utilizing two Wolbachia-specific molecular makers, our study demonstrated the presence of Wolbachia from individual Ae. aegypti samples. Our results showed a low Wolbachia infection rate and inferred the detected strains belong to either supergroups A and B.

تكشف التقارير الأخيرة عن وجود Wolbachia في Ae. aegypti. تقدم دراستنا دعمًا إضافيًا لعدوى Wolbachia في Ae. aegypti من خلال فحص البعوض البالغ الذي تم جمعه ميدانيًا باستخدام صانعي جزيئيين خاصين بـ Wolbachia. تم جمع ما مجموعه 672 من البعوض البالغ Ae. aegypti من مايو 2014 إلى يناير 2015 في مانيلا الكبرى. تمت معالجة كل عينة فردية وفحصها بحثًا عن وجود Wolbachia بواسطة علامات مختارة، وهي 16S rDNA الخاصة بـ Wolbachia وبروتينها السطحي (wsp)، في ظل ظروف PCR محسنة ومتسلسلة. تم تحديد ما مجموعه 113 (16.8 ٪) و 89 (13.2 ٪) من عينات البعوض الفردية المصابة بـ Wolbachia باستخدام علامات Wsp و 16S rDNA، على التوالي. كانت تسلسلات عينة Ae. aegpyti wsp مماثلة أو متطابقة مع خمس سلالات Wolbachia معروفة تنتمي إلى المجموعتين العملاقتين A و B في حين أن غالبية تسلسلات عينة 16S rDNA كانت مماثلة للسلالات التي تنتمي إلى المجموعة العملاقة B. بشكل عام، أظهرت 80 (11.90 ٪) عينات بعوض فردية تضخيمًا إيجابيًا في كلتا العلامتين وأظهرت 69 ٪ تطابقًا في تحديد المجموعة الفائقة (المجموعة العملاقة B). من خلال استخدام اثنين من صانعي الجزيئات الخاصة بـ Wolbachia، أظهرت دراستنا وجود Wolbachia من عينات فردية من Ae. aegypti. أظهرت نتائجنا انخفاض معدل إصابة وولباخيا واستنتجت أن السلالات المكتشفة تنتمي إلى أي من المجموعتين الفائقتين أ و ب.