Comparison of non-radioisotopic endopoins in the local lymph node assay

DOI
  • Ikarashi Yoshiaki
    National Institute of Health Sciences
  • Liu Li
    National Center for Safety Evaluation of Drugs, National Institute for the Control of Pharmaceutical & Biological Products, P.R. China
  • Kaniwa Masa-aki
    National Institute of Health Sciences
  • Tsuchiya Toshie
    National Institute of Health Sciences

Bibliographic Information

Other Title
  • Local lymph node assayにおけるアイソトープを用いない各種エンドポイントの比較

Description

Local lymph node assay (LLNA)は試験物質の皮膚感作性を検出する方法として新たにOECDガイドラインに採用された。本研究では、LLNAにおける感作性物質によるリンパ節活性化反応をラジオアイソトープ(RI)を用いずに判定する非RI-LLNAの確立を目的として、近年報告されている種々の指標の検出感度を比較するとともに、新たに蛍光色素の取り込みを指標とする方法を提案する。24,-Dinitorochlorobenzene (DNCB)及びhexyl cinnamic aldehyde (HCA)をBALB/cマウスに3日間塗布した後、6日目に耳介リンパ節を取り出し、リンパ節重量を測定した。リンパ節細胞数は血球計算盤を用いて求めた。BrdU取り込み量はELISAによる吸光度を、細胞内ATP量は発光量を市販キットにより測定した。また、alamarBlue取り込み量を蛍光強度から求め、試験群の各測定値を溶媒塗布対照群のそれらと比較し、それぞれの指標について増加率(stimulation index, SI)を求めた。DNCBを投与した場合、リンパ節重量は溶媒対照の3.1倍になり、細胞数、ATP量及びalamarBlue取り込み量は5倍以上になった。HCAの場合、リンパ節重量におけるSI値は2.2で、他の測定指標では3から4となった。一方、BrdU取り込み量での判定では他の指標よりは低いSI値を示した。非RIエンドポイントのいくつかは、3HTdRのin vitro取り込み量による判定と同等のSI値を示し、短時間に、かつ同時に多検体の測定を実施できる利点があり、有用と思われた。

Journal

Details 詳細情報について

  • CRID
    1390001205659532800
  • NII Article ID
    130007004264
  • DOI
    10.14869/toxp.33.0.244.0
  • Data Source
    • JaLC
    • CiNii Articles
  • Abstract License Flag
    Disallowed

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