卵丘細胞におけるNeurotensinのEGF受容体発現上昇作用とそれが卵丘細胞膨潤と卵成熟に果たす役割

DOI
  • OKAMOTO Asako
    Graduate School of Comprehensive Scientific Research, Prefectural University of Hiroshima
  • NARITA Ena
    Faculty of Life and Environment Science, Prefectural University of Hiroshima
  • KAWABATA Akane
    Faculty of Life and Environment Science, Prefectural University of Hiroshima
  • SHIMADA Masayuki
    Graduate School of Biosphere Science, Hiroshima University
  • YAMASHITA Yasuhisa
    Graduate School of Comprehensive Scientific Research, Prefectural University of Hiroshima Faculty of Life and Environment Science, Prefectural University of Hiroshima

Description

【目的】我々はLH刺激を受けた顆粒層細胞(GC)がAmphiregulin(AREG)を分泌し，卵丘細胞(CC)のEGF受容体(EGFR)-ERK1/2系の活性化を介し，膨潤関連遺伝子を発現させ，卵丘膨化や卵成熟，排卵が生じることを報告した。しかし，AREG添加によるCCのERK1/2の活性化レベルは低く，卵の受精率及び胚盤胞形成率は体内のそれと比較して低い。このことからAREG以外の新規因子の存在が示唆された。本研究ではマウスのアレイデータベースからERK1/2を活性化する候補因子を探索し，発現・機能解析を行った。【方法】hCG投与したマウスで発現上昇した遺伝子から分泌因子を絞り込みNeurotensin(NTS)を候補化した。3週齢C57BL/6雌マウスにPMSG/hCGを投与後，卵巣，GC，CCを各時間に回収しNtsとNts受容体(Ntsr)遺伝子発現，NTS量測定，NTSとNTSRの局在を調べた。次にPMSG投与48h後回収したCOCをNTS区，AREG区，AREG+NTS区，AREG+NTSR阻害剤（SR）区，AREG+ NTS+SR区で16hまで培養し，pERK1/2の検出，Egfr及び膨潤関連遺伝子(Has2，Ptx3，Tnfaip6)発現，ヒアルロン酸(HA)量測定，COCの直径測定，受精後の受精率と胚盤胞率を測定した。 【結果】排卵刺激後に発現上昇する遺伝子群から，Ntsを同定した。NtsはGCとCCでPMSG投与後まで低値であったが，hCG投与4h後以降両細胞で有意に上昇した。NTS量も排卵刺激により増加した。一方Ntsrは両細胞で恒常的に発現し，NTSとNTSRも両細胞に局在していた。pEKR1/2はNTS区で不検出，AREG区では8hをピークに減少した一方，AREG+NTS区では16hまで強いシグナルが維持された。pERK1/2が脆弱したAREG区の12h後において，膨潤関連遺伝子の発現は低値であったが，AREG+NTS区では高発現を維持し，このときAREG+NTS区でEgfr発現はAREG区よりも高値であった。HA量，COC直径，受精率，胚盤胞率もAREG+NTS区はAREG区に比べ高値であった。

Journal

Details 詳細情報について

  • CRID
    1390001205716419840
  • NII Article ID
    130005475020
  • DOI
    10.14882/jrds.107.0_aw-2
  • Text Lang
    ja
  • Data Source
    • JaLC
    • CiNii Articles
  • Abstract License Flag
    Disallowed

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