牛乳蛋白質の発癌性ヘテロサイクリックアミンに対する結合性

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  • Binding Ability of Bovine Milk Proteins to Mutagenic Heterocyclic Amine of 3-amino-1, 4-dimethyl-5H-pyrido[4, 3-b]indole
  • 牛乳蛋白質の発癌性ヘテロサイクリックアミンに対する結合性〔英文〕
  • ギュウニュウ タンパクシツ ノ ハツガンセイ ヘテロ サイクリック アミン ニ

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抄録

牛乳中の各種蛋白質、即ち whole casein, αs-casein, β-casein, κ-casein, β-lactoglobulin A, β-lactoglobulin B, α-lactalbumin, lactoferrin, lactoperoxidase を分離精製し、これらの蛋白質が発癌性ヘテロサイクリックアミンである 3-amino-1, 4-dimethyl-5Hpyrido[4, 3-b]indole (Trp-P-1) と給合するか否かについて実験を行った。さらに我々自身で分離調製した蛋白質と比較検討する為にSigma社製のα-casein, β-casein, κ-casein, β-lactoglobulin A, β-lactoglobulin B, α-lactalbumin, lactoferrin, lactoperoxidase ついても同様の実験を行った。凍結乾燥した蛋白質2mg, Trp-P1 20μgを0.4mlのpH7.4, 50mM燐酸バッファーに溶解し、37℃で10分間振盪し反応させる。つづいて、日本ミリポアリミテッド製のUFC3LGC00を用いて反応液中の非結合型 Trp-P-1 を限外濾過により分離し、この Trp-P-1 を HPLC 法により測定する。HPLC は日立 L-6000ポンプ・L-4000UV 検出機に GL-Science 製 Inertsil ODS-2(4.6×150mm)カラムを使用し、acetonitrile-H2O-triethylamine 50:50:0.05 で展開した。254nmに於ける吸収を SIC System Instruments 製Labchart 12で記録する。Whole casein:54.04%, αs-casein:40.02%, β-casein:56.24%, κ-casein:33.75% で反応液中の Trp-P-1 を比較的に高い割合で結合した。Sigma 社製の α-Casein:59.46%, β-casein:40.43%, κ-casein:23.75% で類似の傾向を示した。β-Lactoglobulin A:23.61%, β-lactoglobulin B:17.87%, β-lactoglobulin A・Sigma:15.78%, β-lactoglebulin B・sigma:3.65% であった。Lactoperoxidase:15.20%, lactoperoxidase・Sigma:6.41%, lactoferrin-a:22.53%, lacteferrin-b:6.92% であったが、α-lactalbumain, α-lactalbumin・Sigma, lacteferrin・Sigma は Trp-P-1 と結合しなかった。

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