キャピラリーゲル電気泳動によるリガーゼ検出反応生成物の分析

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タイトル別名
  • Capillary gel electrophoresis for ligase detection reaction products
  • キャピラリーゲル デンキ エイドウ 二ヨル リガーゼ ケンシュツ ハンノウ セイセイブツ ノ ブンセキ
  • キャピラリー ゲル デンキ エイドウ ニ ヨル リガーゼ ケンシュツ ハンノウ セイセイブツ ノ ブンセキ

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抄録

正常型DNAから微量の変異DNAを識別する手法の一つとして,ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)/リガーゼ検出反応(LDR)が知られている.このPCR/LDRアッセイによって得られたLDR生成物は,マイクロアレイやスラブゲル電気泳動によって分析されるのが一般的である.本研究で,筆者らは,LDR生成物の分析のために,キャピラリーゲル電気泳動(CGE)-蛍光(FL)検出システムを適用した.CGE-FL分析システムにおいて,一本鎖DNAとも結合し蛍光を発するSYBR Goldを分離マトリックスであるポリエチレンオキシド(PEO)ポリマー溶液に添加し,分析を行った.本分析システムにおいて,LDR生成物をLDRプライマーやテンプレートなどの他のDNAフラグメントから分離・検出することが可能となり,K-ras遺伝子のコドン12における一塩基置換の識別が達成された.

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