DNAプローブ固定化微粒子を用いたDNA一塩基変異検出法の開発

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タイトル別名
  • Development of DNA point mutation detection methods using probe DNA-immobilized microbeads
  • DNA プローブ コテイカ ビリュウシ オ モチイタ DNA イチエンキ ヘンイ ケンシュツホウ ノ カイハツ

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抄録

正常型DNAから微量の変異DNAを識別する手法の一つとして,ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)/リガーゼ検出反応(LDR)が知られている.PCR/LDR反応によって得られたターゲットであるLDRプロダクトは,マイクロアレイやゲル電気泳動により分析することができる.本研究では,ターゲット-プローブ間のハイブリダイゼーションにより蛍光標識されたLDRプロダクトを選択的に捕捉するためにプローブDNAが固定化された磁性微粒子を用いた.ハイブリダイゼーションの後,微粒子を洗浄しキャピラリーチューブに導入し,磁石を用いてチューブ内の一カ所に堆積させた.蛍光あるいは化学発光検出を適用することによりチューブ内の微粒子集合体から発光シグナルが得られ,本法がDNA変異検出に適用可能であることが示された.

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