血漿からのエクソソームRNA抽出試薬の比較・検討―CD9 RT-qPCR法にて―
書誌事項
- タイトル別名
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- Comparison of commercially available kits for exosomal RNA isolation from plasma: qRT-PCR analysis of exosome marker CD9
抄録
<p>近年,体液中でタンパク質や核酸を内包する小胞であるエクソソームが注目され,エクソソーム中のタンパク質,RNAから疾患診断のバイオマーカーが見いだされる期待が高まっている。それに伴い,血液中のエクソソームを抽出する試薬が開発されているが,その抽出効率について統一された結論は出ておらず,超遠心法が依然として信頼性高いという現状である。超遠心法は,設備の準備と技術の習得に高いハードルがあり,効率的なエクソソーム研究と臨床応用には不向きであり,市販の試薬での安定したエクソソームの抽出が期待される。本研究では,血液中のエクソソームからタンパク,mi-RNAで良好な抽出報告のあるExoRNeasy(QIAGEN社)と,新たに開発されたPlasma/Serum Exosome Purification Kit(NORGEN社)2種類の試薬について,血漿からエクソソーム中のmRNAの抽出効率の評価を行った。方法は健常人血漿を対象に,RNA定量と,エクソソームマーカーCD9によるRT-qPCR法を実施した。RNA定量値,CD9のRT-qPCR共通して,ExoRNeasyによる抽出したmRNAで良好な結果が確認され,本研究で市販の試薬を用いてエクソソーム中のmRNAの安定した抽出の確認がされた。この成果を基に,新たなバイオマーカーの確立の研究および,臨床応用につなげていきたいと考えている。</p>
収録刊行物
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- 医学検査
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医学検査 71 (4), 644-650, 2022-10-25
一般社団法人 日本臨床衛生検査技師会
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詳細情報 詳細情報について
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- CRID
- 1390012390812222080
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- ISSN
- 21885346
- 09158669
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- 本文言語コード
- ja
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- データソース種別
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- JaLC
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- 抄録ライセンスフラグ
- 使用不可