種特異／共通的な精子機能に着眼した精子凍結法と融解法の開発

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  • The Development of a Sperm Cryopreservation and Thawing Method based on Species-Specific and Common Sperm Biology
  • タネ トクイ/キョウツウテキ ナ セイシ キノウ ニ チャクガン シタ セイシ トウケツホウ ト ユウカイホウ ノ カイハツ

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抄録

精子の凍結では，融解後の運動性は動物種や個体間で大きな違いがある．したがって，安定的に良好な凍結精液を作成し受精に用いるため，動物種毎に最適化した精子凍結法を開発しなければいけない．さらに，凍結精液技術は，精液処理，凍結，融解に区分されることから，それぞれの工程を最適化する必要がある．我々は，凍結前処理では，精液中の細菌性内毒素に着目し，ヒトではIsolate法，ブタでは中和剤の添加を行った．また，凍結時には，高張液によって効果的に脱水を行うことにより，凍結保護剤であるグリセロール濃度を可能な限り低くすることが可能となることを示した．これらの凍結方法により，融解直後の精子運動性を向上させることができたが，長時間培養後には著しく運動性が低下した．その原因として，融解直後の精子細胞膜からのCa 2+の流入が，一過的なキャパシテーションを誘導していることが明らかとなった．そこで，Ca 2+キレート剤を融解液に添加した結果，Ca2+の流入を防ぐことにより急激な運動性の上昇が抑制され，長時間にわたって運動性が維持された．これらの凍結，融解方法を用いることにより，融解後の精子の精子細胞膜を保護，運動の持続性，精子DNA断片化率の低下に成功した．ブタにおいては．人工授精での受胎率の増加が認められており，ヒトでもその応用が期待される．<br>

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