Time-lapse cinematography対応型マイクロウェル培養システム: 単一胚の発生追跡ツール

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  • Time-lapse Cinematography Compatible Polystyrene-based Microwell Culture System: A Novel Tool for Tracking the Development of Individual Embryos

抄録

【目的】我々はtime-lapse cinematography (TLC)観察に適した，新規well of the well システム(WOW)を開発した．本研究では，開発したWOWにより培養したウシ体外受精(IVF)胚の体外および体内発生を通常の集団培養胚のそれらと比較した．【方法】実験1，25個のIVF胚を125µlの5%CS添加CR1aaの培養滴(対照区)およびWOWに導入し，168時間の体外培養を行った．胚盤胞への発生率，胚盤胞の内部細胞塊(ICM)細胞数，栄養外胚葉(TE)細胞数，TUNEL陽性細胞率，および酸素消費を解析した．対照区およびWOW区に由来する胚盤胞を移植し，受胎率を算出した．実験2，Ovum pick-up (OPU)-IVF胚をWOWに導入し，リアルタイム細胞観察システムで168時間培養した．得られた胚盤胞を仮親に移植した．移植した胚盤胞の第一卵割の速度とパターンを解析し，受胎率との関係をロジスティック回帰により分析した．【結果】実験1，胚盤胞への発生率，ICMおよびTE細胞数は，WOW区と対照区で違いは認められなかった．TUNEL陽性細胞率はWOW区で，対照区に比べ低かった(P < 0.01)．WOW由来胚の酸素消費は，対照区より体内由来胚のそれに類似した．WOW由来胚を移植した場合の受胎率53.6%は，対照区由来胚の 20.0%に比べ高い傾向にあった（P = 0.07）。実験2，第一卵割速度と受胎率に相関は認められなかったが，第一卵割パターンと受胎率に相関が認められた(P = 0.04)。第一卵割時にfragmentを伴わず，かつ均一な2割球に分裂した胚の受胎率は66.7%と，異常卵割した胚の33.3%に比べ高かった．以上，開発したTLC対応型マイクロウェル培養システムは高品質なウシIVF胚の効率的生産および選択，さらには胚の生育予測因子を解析する強力ツールになることが示された。本研究は生研センター異分野融合研究支援事業の助成を受けた．

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詳細情報 詳細情報について

  • CRID
    1390282680693189248
  • NII論文ID
    130007025030
  • DOI
    10.14882/jrds.103.0.141.0
  • 本文言語コード
    ja
  • データソース種別
    • JaLC
    • CiNii Articles
  • 抄録ライセンスフラグ
    使用不可

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