リアルタイムPCR法による遺伝子組換えカイコの挿入遺伝子数検証法について

  • 小島 桂
    国立研究開発法人 農業・食品産業技術総合研究機構 新素材開発グループ

書誌事項

タイトル別名
  • Using qPCR method to find the number of transgenes inserted in the <i>Bombyx mori</i> genome
  • リアルタイム PCRホウ ニ ヨル イデンシ クミカエ カイコ ノ ソウニュウ イデンシスウ ケンショウホウ ニ ツイテ

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抄録

<p> piggyBacを用いた遺伝子組換えカイコにおける組換え遺伝子の挿入数をリアルタイムPCR法を用いて確定する方法を検討した.検出配列として,piggyBacのR-arm配列を用い,内部標準としてhsp90遺伝子を用いたところ,0,1および2コピーのpiggyBac R-arm配列の挿入数を確定することが出来た.また,同様に8コピーまでの挿入でも,挿入数既知の標準サンプルと比較することで挿入遺伝子数を決定できることが示された.本法とサザンハイブリダイゼーションによる組換え遺伝子の挿入座数の決定を組み合わせることで,遺伝子組換えカイコの組換え遺伝子がホモ接合体かどうか容易に推定できる.</p>

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